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在潘諾夫斯基所總結的如何利用圖像學嚴謹?shù)谋磉_自己的觀點的時候提出了三個步驟，這是對于我們后人研究方法的一個總結，但我覺得在對于反推當時作為它者的觀眾的理解情況有一定的借鑒意義：
1.前圖像志描述。是運用實際經(jīng)驗對作品的自然主題進行解釋，他指出其中還需要利用風格史對解釋進行矯正。自然主題被稱為藝術母題的世界，是對當時的視覺經(jīng)驗的再現(xiàn)，對一件作品的這一層面的把握是當時的人可以具有的。
2.圖像志分析。是運用原典知識對作品的程式主題進行分析，即分析構成圖像和寓意的世界，在這一階段需要類型史的矯正。文藝復興之前是中世紀的基督教統(tǒng)治時期，這一時期是完全的宗教統(tǒng)治，使真正的古典傳統(tǒng)幾乎消失殆盡，所以經(jīng)過這100年的發(fā)展，人們對于基督教原典的了解應該十分熟練，但是對于真正異教題材的了解應該并不多，盡管將基督教神學和新柏拉圖主義融合的新柏拉圖主義在這一時期十分盛行，但這種影響也主要作用于人文主義圈，普通大眾對此并不太了解，我想就此可以認為所謂的將“古典主題和古典母題重新合二為一的文藝復興的藝術作品”只是在人文主義圈流傳。
3.圖像學解釋。是利用綜合直覺對作品的內(nèi)在意義進行解釋，也就是了解作品的象征價值，需要文化象征史的矯正。后者無論是對于當時的人，甚至是學者還是對于現(xiàn)在的我們都是需要去特別的學習的。綜合直覺我覺得可以理解為我們通常所說的“悟性”，所悟之事是時代特征，是根本原理，潘諾夫斯基認為，藝術中所為人捕捉的根本原理的展現(xiàn)并不是藝術家刻意去表現(xiàn)的，他可能并不知覺，對這部分的把握應該就不是當時的觀者所能把握的。那么也就是說，當時的人在欣賞一件作品時只能達到圖像志分析的階段，也就是通過掌握藝術母題的結構關系從而掌握藝術作品的寓意。結合圖像學方法和當時基督教傳統(tǒng)的背景以及新柏拉圖主義思想的流行，在當時藝術作品的內(nèi)容應該要比具體表現(xiàn)的形式重要。文藝復興時期的藝術的一個特征是忠于原典，無論是基督教中的人物還是異教的人物形象，其數(shù)量是固定的，其“擬人形象”都配有象征其身份的“屬像”，由于藝術母題的有限，而要表達的思想無止境，亦或是不斷變化，這就需要當時的人對潘諾夫斯基在上述第二個階段中所提及對于研究者的要求——對“類型史”把握，對于當時的人來說也就是了解特定的主題和概念在不同時期被對象和事件所表現(xiàn)的方式。
二、作為“教科書”的創(chuàng)作
文藝復興的名字是來自于對“古典古代的再生”，這種對于“古典”的關注，并不能理解為此前的中世紀藝術就完全摒棄古典藝術，只是在中世紀藝術中，古典母題與古典主題相分離，一種是將異教形象替換成基督教中的人物，另一種是古典原型中的純粹的構圖。而在文藝復興時期二者又重新結合起來，二者相分離的原因在于代表古希臘的再現(xiàn)傳統(tǒng)和代表中世紀基督教的原典傳統(tǒng)之間的差異，更是異教傳統(tǒng)和基督教傳統(tǒng)的不容，所以說要想實現(xiàn)真正的藝術復興，調(diào)和基督教神學和異教神學是關鍵。文藝復興時期的新柏拉圖主義學說的發(fā)展就適應了這一時期想要在基督教的統(tǒng)治下復興古典藝術的需要，即以菲奇諾為代表的新柏拉圖主義者實現(xiàn)了將“基督教神學與偉大的異教哲學成功地結合在一起”，在實現(xiàn)柏拉圖主義的同時，還實現(xiàn)與基督教的完美和諧。文藝復興時期對于原典的研究過程中，為適應基督教的統(tǒng)治，出現(xiàn)了將古典諸神道德化解釋的趨勢，這一表現(xiàn)同樣適用于藝術。藝術家為基督教創(chuàng)作的作品的目的無疑是為了教化群眾，所以更能體現(xiàn)出中世紀到文藝復興轉變的作品是異教題材繪畫。貢布里希在對文藝復興的研究中，主張“重構方案”，就是將當時訂購人的委托方案最大限度的恢復。在他的文章《波提切利的深化作品——對他圈子里的新柏拉圖學派象征體系的研究》中，他對這位被稱為“藝術中異教主題創(chuàng)始人”的波提切利的圈子，實質上是他的贊助人洛倫佐•迪•皮耶爾弗朗切斯科的新柏拉圖學派圈子的研究。文章中他從贊助人和新柏拉圖主義以及原典的角度分析了波提切利的異教作品中的具有道德化意義的“象征意義”，但對此我更關注的是他通過幾封交往的信件而重構出的委托情形，即是，《春》這幅作品實質是菲奇諾為了讓洛倫佐•迪•皮耶爾弗朗切斯科能夠銘記道德訓誡的手段，菲奇諾注重視覺力量，這畫面中的維納斯代表著他要提醒小洛倫佐的“人性”的美德，他希望小洛倫佐能過通過被維納斯這位美麗的寧芙迷住的同時獲得她所代表的“人性”的美德。這是文藝復興時期的一種“教科書”式的典型的繪畫作品，這一時期的藝術，無論是否是異教，其表達都要向基督教的傳統(tǒng)去“屈服”，于是就出現(xiàn)了這種藝術普遍道德化的傾向。
三、結語
貢布里希在文章中說，新柏拉圖主義“向世俗藝術打開了迄今為止一直為宗教所獨占的感情領域”。但是他雖開啟了世俗藝術，但我認為這并沒有真正的走向“世俗”，甚至是更加遠離，也許這就是之后西方藝術普遍追求精英性的“根源”，當然，這只是我各人的猜測。之所以這么說是因為，經(jīng)過中世紀進入文藝復興，對于基督教的了解，可以使人們基本了解宗教題材作品的內(nèi)容，但是對于對傳統(tǒng)中斷的異教題材的了解甚微的公眾來說，這一題材繪畫就難以理解，加之新柏拉圖主義等哲學信息的介入，使作品只有“精英圈子”的人得以理解。文藝復興的藝術幾乎都是具有象征意義的，無論是基督教藝術去表現(xiàn)教義，還是異教題材去表現(xiàn)哲學，它們的內(nèi)容都具有道德化傾向，觀看的重點在于對作品意義的體悟，這就要求觀者要受過一定的教育，對于每一個信息的了解，就像是需要帶著“字典”看藝術品；另一方面這樣的作品都是帶有教育意義的，目的是讓觀者受到相應表達的教育甚至是成為這一“擬人像”所代表的象征意義的人。
參考文獻：
[中圖分類號] R779.6 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2017）10-220-04
Prevention of intraocular infection after cataract surgery in primary hospital
YANG Yi NIU Meimin LI Keqin HUANG Huaijie ZHANG Xiaojuan XIE Yueshu
Department of Ophthalmology，Shunde District Second People’s Hospital，F(xiàn)oshan 528305，China
[Abstract] Objective To explore the method and clinical effect of prevention of intraocular infection after cataract surgery in primary hospital. Methods 90 patients carried on cataract surgery in our hospital from March 2015 to March 2016 were selected as the study object.According to the single and double admission，they were divided into control group and observation group with 45 cases in each.Patients in control group were treated with traditional preoperative treatment，and patients in observation group were treated with improved preventive measures.Intraocular infection rate and ocular symptom score of the two groups after operation were compared. Results Intraocular infection rate of observation group was 0，and the ocular symptom score was （1.2±0.4）.Intraocular infection rate of control group was 2.22%，and the ocular symptom score was （1.8±0.5）.The indicator of observation group was significantly better than the control group，the difference was statistically significant （P
[Key words] Cataract；Surgical treatment；Intraocular infection；Improved preventive measures
白日希cataract）指的是眼球內(nèi)的晶狀體組織出現(xiàn)混濁現(xiàn)象，混濁程度越嚴重則對患者視力影響越嚴重[1]。據(jù)流行病學調(diào)查顯示，白內(nèi)障是導致視力殘疾、致盲最主要原因。隨著醫(yī)療水平的提高現(xiàn)在沿海城市基層醫(yī)院亦多采用超聲乳化白內(nèi)障摘除+人工晶體植入手術進行治療，但由于患者衛(wèi)生意識薄弱、醫(yī)院預防措施不到位、衛(wèi)生條件較差等原因引發(fā)眼內(nèi)感染情況。眼內(nèi)感染會導致眼內(nèi)結構損傷，嚴重者會出現(xiàn)視力喪失情況，給患者生理、心理帶來巨大傷害[2]。改良式預防措施從術前患者、醫(yī)護人員準備，術中的密切配合以及術后病情監(jiān)護、護理干預進行全面預防，旨在降低術后并發(fā)癥的發(fā)生率。本研究探討基層醫(yī)院白內(nèi)障患者手術中及圍手術期采用改良式預防措施來減少眼內(nèi)感染的發(fā)病率，現(xiàn)報道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選擇我院自2015年3月～2016年3月間收治的經(jīng)白內(nèi)障超聲乳化+人工晶體植入手術治療的白內(nèi)障患者90例，隨機將其分成兩組，對照組患者45例，男女比例為20：25，單只45例，年齡40～78歲，平均（62.3±2.4）歲；觀察組患者45例，男女比例為21：24，單只43例、雙只2例，年齡49～77歲，平均（61.8±2.0）歲，兩組患者的基本資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。本次實驗經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準實施。
1.2 納入和排除標準[3]
納入標準：非外傷導致的白內(nèi)障患者，血常規(guī)檢查、生命體征指標和凝血功能均正常的患者，對本次研究知情且愿意簽署授權書的患者。排除標準：排除淚囊炎、角膜炎等感染性眼疾患者，伴有全身性感性性疾病患者，眼表有陳舊性瘢痕患者。
1.3 方法
1.3.1 手術方法 兩組患者均采用白內(nèi)障超聲乳化+人工晶體植入手術治療，取仰臥位常規(guī)消毒鋪巾，使用丙美卡因（Alcon.H20160133）行表面麻醉處理，開瞼器開瞼，10點位行透明角膜主切口，2點位行輔助切口，然后連續(xù)環(huán)形撕囊并離水分層，刻槽劈核，將晶體核“分而治之”，I/A抽吸剩余皮質，再將人工晶體植入囊袋，抽吸粘彈劑，水密主切口，前房形成，使用醫(yī)用紗布進行包扎處理。
1.3.2 預防干預 對照組術前約2天滴妥布霉素（s.a.ALCON-COUVREUR n.v.，H20140811）眼藥水，3次/d；手術當天入手術室前20min使用慶大霉素（河南潤弘制藥股份有限公司，H20003004）稀釋液沖洗患者結膜囊，然后滴入濃度為0.1%的聚維酮碘；進入手術室后二次沖洗結膜囊，眼周部位使用濃度為0.5%的聚維酮碘消毒。觀察組術前約2天滴妥布霉素（s.a.ALCON-COUVREUR n.v.，H20140811）眼藥水，3次/d；（1）術前準備：①眼部準備。患者入院后由護士剪掉睫毛，并使用濃度為0.05%碘伏或慶大霉素稀釋液（500mL生理鹽水溶入16萬U慶大霉素）對睫毛根部、淚道、結膜囊消毒處理；術前由醫(yī)護人員對患者眼部進行檢查和訓練，檢查項目包括遠近視力、光感、眼壓和眼底情況。訓練項目即提升患者注視顯微鏡燈的固視能力。術前叮囑患者保持個人衛(wèi)生如洗漱、換衣，同時做好保暖工作。②情志干預。白內(nèi)障患者對手術了解較少因此對治療效果存有疑慮，同時對手術心存恐懼和緊張情緒甚至排斥治療。因此醫(yī)生在術前主動和患者攀談，告知手術治療的原理和過程，耐心講解手術中的注意事項和配合要點，消除疑慮緩解恐懼增強治療的信心。（2）術中處理：保持適宜的手術室溫度（26℃左右）、濕度（55%左右），使用空氣消毒機在手術過程中全程消毒；核對患眼和人工晶體度數(shù)是否一致，術前約5min時向結膜囊滴入濃度為0.1%聚維酮碘消毒，眼周手術部位使用濃度為0.5%的聚維酮碘消毒。（3）術后預防：叮囑患者使用典必殊眼液（s.a.ALCON-COUVREUR. n.v.，H20150119）；密切^察患者的病情、生命體征變化，叮囑患者盡量臥床休息，不要揉眼睛；若出現(xiàn)視力下降，眼睛畏光、發(fā)紅等異?，F(xiàn)象立即檢查并治療。
1.4 觀察指標
（1）眼內(nèi)感染發(fā)生的判斷。在術后1周內(nèi)若出現(xiàn)玻璃體渾濁、結膜水腫、充血且分泌物增加，前房水混，視物下降、流淚、畏光、創(chuàng)口劇烈疼痛者判定為眼內(nèi)感染。（2）眼部癥狀評分。采用眼部刺激主觀癥狀評分系統(tǒng)進行評價，通過問答形式分別對患者眼睛干澀、瞼緣眼紅、外眼瞼紅腫、眼部灼燒感、視物情況等進行評價，眼睛干澀依據(jù)其輕度、中度和重度分別記為1～3分，總得分越高則表示眼部癥狀越嚴重[4]。
1.5 統(tǒng)計學方法
采用SPSS20.0統(tǒng)計學軟件處理本次研究數(shù)據(jù)，計數(shù)資料用（%）表示，采用χ2檢驗，計量資料用（）表示，采用t檢驗，P
2 結果
2.1 兩組患者術后眼內(nèi)感染率情況比較
觀察組患者在白內(nèi)障手術圍術期采用改良式預防措施，結果術后出現(xiàn)眼內(nèi)感染人數(shù)為0例，感染率為0；常規(guī)預防措施的對照組患者術后眼內(nèi)感染發(fā)生率為2.22%（1例），兩組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P
2.2 兩組患者眼部癥狀評分情況比較
兩組患者分別在術前、術后1周采用癥狀評分系統(tǒng)對患者眼部主觀感受進行評價，結果術前兩組患者的評分差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），行不同預防措施后觀察組患者評分顯著低于對照組，比較差異有統(tǒng)計學意義（P
3 討論
白內(nèi)障是由于各種原因導致的晶體代謝異常、蛋白變性產(chǎn)生的渾濁病變現(xiàn)象[5]。白內(nèi)障摘除手術是較為傳統(tǒng)的治療方法，隨著手術技術的成熟和方式的完善，白內(nèi)障治療的安全性和有效性明顯提升。眼內(nèi)感染是內(nèi)眼手術后罕見但嚴重的并發(fā)癥，可嚴重影響患者視力，而且90%的感染性眼內(nèi)炎發(fā)生于白內(nèi)障術后[6]。眼內(nèi)感染是白內(nèi)障摘除手術后主要的并發(fā)癥之一，不僅會影響患者視力的恢復甚至會致殘和致盲，因此圍術期系統(tǒng)的處理手段是預防術后眼內(nèi)感染的關鍵[7]。相關研究[8-9]發(fā)現(xiàn)導致患者術后早期感染的細菌多來自眼睛附屬器和眼周皮膚，如結膜囊、瞼板腺以及眼周皮膚等。一般的存留于結膜囊、瞼板腺等的細菌不會引發(fā)感染情況，但在手術治療后患者的免疫機能明顯下降，再加上手術創(chuàng)口以及人工晶體的植入等因素導致感染機會增加。鑒于此，術前對該些部位進行徹底消毒沖洗是降低感染率的關鍵，基層醫(yī)院醫(yī)療設備相對簡陋、人力資源緊缺，導致健康宣傳不到位、圍術期消毒等操作不夠規(guī)范等均是引發(fā)術后眼內(nèi)感染的原因。
本次研究對常規(guī)的預防處理方案進行改良和完善，術前指導或協(xié)助患者做好眼部準備，如修剪睫毛、沖洗消毒結膜囊等部位，徹底將存留在眼部周圍的細菌清除干凈；同時叮囑患者注意個人衛(wèi)生，換洗干凈衣服、洗澡、洗頭等清除一切可能接觸到的細菌。情志干預的目的主要是消除患者緊張和害怕心理，能夠以積極的心態(tài)面對手術治療，在轉變患者主觀感受的同時建立與醫(yī)生之間的信任感[8-9]，另外良好的心態(tài)能夠提升手術治療的有效性和安全性。術前應使用聚維酮碘對結膜囊和眼周皮膚再次沖洗消毒。而對照組患者僅在術前和手術開始前5min使用聚維酮碘沖洗眼部和周圍皮膚，未針對術后眼內(nèi)感染進行系統(tǒng)性預防處理，結果觀察組患者術后感染率為0，而對照組患者有一例感染（后通過及時治療得到控制）感染率2.22%，比較差異有統(tǒng)計學意義（P
妥布霉素具有廣譜抗革蘭陰性和陽性菌的活性，有研究顯示白內(nèi)障手術患者結膜囊內(nèi)細菌對其藥物敏感率為52%[10]。術前使用妥布霉素滴術眼可有效抑制結膜囊內(nèi)部分細菌，但不絕對。聚維酮碘是眼部手術中應用最為廣泛的殺菌消毒藥物，其特c是對黏膜無刺激性且消毒效果顯著，因此成為黏膜部位手術唯一的消毒藥物，它對多重耐藥菌[11]，念球菌，病毒[12]，棘阿米巴[13]，菌膜等均有效。據(jù)研究資料報道[14-15]，聚維酮碘殺菌速度快，一般在10～30s間便可產(chǎn)生顯著的殺菌效能，但是其也存在一定的角膜毒性導致部分患者在手術治療后眼部出現(xiàn)刺激感。本次實驗對兩組患者治療前后的眼部癥狀進行評分，術前與術后比較，術后患者眼部癥狀均改善明顯；而術后觀察組與對照組比較，觀察組眼部癥狀評分明顯低于對照組，分析其原因可能是對照組患者術前使用聚維酮碘消毒后未使用沖洗液清洗藥物殘留，改良式預防措施的觀察組患者眼部癥狀評分滿足臨床要求。本研究的缺陷即收集的研究對象范圍狹窄、人數(shù)較少，未對導致眼內(nèi)感染的細菌進行培養(yǎng)研究，希望在之后的研究中分析導致眼內(nèi)感染的細菌類型為臨床預防和治療提供指導。
綜上所述，在基層醫(yī)院白內(nèi)障手術治療圍術期使用改良式預防措施并應針對術后眼內(nèi)感染制定系統(tǒng)的預防措施，能降低術后眼內(nèi)感染的發(fā)生率，改善患者眼部不良癥狀表現(xiàn)。
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城市最早出現(xiàn)的公益機構中，就有醫(yī)院[1]。在武漢地區(qū)，百年歷史的有市普愛醫(yī)院（源于1864年）、協(xié)和醫(yī)院（源于1866）、省中醫(yī)院（1868年）、市三醫(yī)院（1875年）、市中心醫(yī)院（1880年）、同濟醫(yī)院（1900年）等，到1939年武漢地區(qū)已有13所教會醫(yī)院[2]。由于建院歷史悠久，這些醫(yī)院中依稀存有少量的百年建筑物。百年建筑物是醫(yī)院歷史的見證，但不同程度存在著修繕困難、難以使用的現(xiàn)實。如何有效修繕，并最大限度發(fā)揮百年建筑物的歷史見證功能和現(xiàn)實使用功能，我們做過一些探索，取得過較好效果?，F(xiàn)簡要報告如下。
1.武漢地區(qū)醫(yī)院百年建筑物的建筑及結構特點
建筑特點?；浇虃魅胛錆h，是在清咸豐十一年（1861年）、漢口被迫開埠以后。1861年6月，英國倫敦會教士楊格非到達漢口，在漢口漢正街金庭公店開始傳教。隨著基督教來到武漢，基督教主辦的教會醫(yī)院也開始出現(xiàn)在武漢[2,3]。這些教會醫(yī)院的建筑，以歐式建筑風格為主，也融入了一部分中國建筑文化元素。哥特式的拱形門、大窗戶，拜占庭式的圓穹頂，與中國傳統(tǒng)的圓木立柱相結合。武漢教會醫(yī)院具有代表性的是武昌仁濟醫(yī)院建筑群，1884年美國基督教圣公會傳教醫(yī)生彭勒來武昌府街口創(chuàng)建武昌仁濟醫(yī)院，1891年遷至武昌曇華林。1895年仁濟醫(yī)院新樓落成，醫(yī)院呈三合院布局，主樓兩層磚木結構，兩側輔以外廊式配樓，立面具有明顯的文藝復興風格。
結構特點。建筑物依其所使用的材質劃分為，土石結構、木結構、磚木結構、砌體結構、混凝土結構、鋼結構、鋼混結構等。武漢教會醫(yī)院建筑物基本是磚木結構，只有極少數(shù)是混凝土結構。由于木質材料耐腐蝕性較差，瓦片的自然分化較為容易，因此磚木結構建筑與鋼結構、鋼混結構等現(xiàn)代建筑相比，使用壽命要短一些，經(jīng)風經(jīng)雨、抗擊地震、抵御沖撞的能力也要弱一些。
2.醫(yī)院百年建筑物的一種修繕方法
歷經(jīng)百年后，這些磚木結構的老舊建筑物雖幾經(jīng)維修，但多數(shù)是外觀外貌猶在、內(nèi)部破損不堪。這種不堪表現(xiàn)為：屋頂?shù)囊恍┠緱l已腐爛，地面的木質地板大部分也難以承受行走等基本荷載。
頂上的土瓦隨時可能砸下來，走在地板上的人隨時可能被陷進去。出于安全考慮，這些百年建筑物中的近一半被閑置起來。拆除吧，是遺憾，不拆除吧，又難以使用。
目前最常用的修繕方法是拆爛補缺。該方法是拆除掉屋頂、地板中腐爛的部分，然后對缺損、腐爛的地方進行修補。這種方法的結果是，較好地保存了建筑物的外觀外貌及內(nèi)部結構風格，適合于歷史文物級的老舊建筑物的保存。缺憾是無法從根本上延長老舊建筑物的保存年限，同時，也限定了老舊建筑物的正常使用。
對于沒有被納入歷史文物范疇的百年建筑物，可以嘗試另一種修繕方法：1、對于墻體部分，原汁原味地保留。2、對已經(jīng)超過了使用年限的地板、屋頂部分，采用現(xiàn)代鋼筋混凝結構徹底替代。3、通過鋼筋混凝結構，調(diào)整內(nèi)部樓層的高度。4、利用工程技術，將原汁原味的墻體部分與現(xiàn)代鋼筋混凝結構的內(nèi)部主體部分有效連接。
這種修繕方法可以達到3個效果：1、原汁原味保留了老舊建筑物的外貌。2、內(nèi)部主體部分采用鋼筋混凝結構，使老舊建筑物今后的使用年限一如嶄新的現(xiàn)代建筑。3、樓層高度的調(diào)整，鋼筋混凝結構的大跨度，使老舊建筑物內(nèi)部的實用性大大增強。
3.醫(yī)院百年建筑物修繕如舊使用如新的實踐
武漢市第三醫(yī)院臨近彭劉楊路的一幢3層建筑，始建于1900年前后，已有100年歷史，該建筑物曾是教會醫(yī)院管理者的寓所?？紤]到居住實際，該建筑物一樓低矮，主要用于堆放雜物。二樓、三樓層高相對寬松，以內(nèi)樓梯與一樓相連。每層建筑面積90平米，3層共270平米。
建筑物外觀是較典型的哥特式風格，拱形門、大窗戶。木條鐵皮平面樓頂，木質地板、木質樓梯。歷經(jīng)100年風雨后，雖幾經(jīng)小修小補，該建筑依然破損嚴重。更主要的是，一樓1.8米、二樓三樓各3.6米的層高，限定了它作為醫(yī)療業(yè)務用房的使用。該建筑先后用于單位幼兒園，也被出租用于小型餐飲。2011年經(jīng)營餐飲過程中失火，被消防部門勒令停業(yè)?；馂倪^后，一、二層間的樓板幾近坍塌，已無法繼續(xù)使用，該建筑物被閑置下來。2004年，武漢市第三醫(yī)院決定對該建筑物徹底修繕，用于小兒眼科、成人眼科的門診。
第一步：確定方案。保留該建筑物的四周外墻，掏空層板和頂板，改用鋼筋混凝框架結構，內(nèi)框架結構與西式風格的外墻連接。
第二步：地基勘察。請勘察設計部門對該建筑物所處地質結構進行勘察，提出地質基礎報告。
第三步：施工設計。委托具備設計資質的建筑設計所設計。一樓層高調(diào)整為3.6米，二、三樓層高調(diào)整為2.7米。施工圖紙出來后，按程序進入施工單位的招標選擇。
第四步：維修施工。依次按以下程序進行。1、拆除墻體以外部分，采用鋼管和扣件等對墻體拉緊、固定，確保后續(xù)施工安全。2、采用沉臺法基礎施工。3、鋼筋混凝框架施工。隨著鋼筋混凝框架高度的上升，框架結構層面鋼筋頭逐步與原有墻體連接、固定，從下層開始逐步拆除固定墻體的鋼管和扣件。4、屋面防水處理。5、依功能所需和布局考慮，對框架結構內(nèi)部隔斷。6、地面、墻面、頂部裝修與粉刷。
第五步：修繕驗收。
整個修繕過程歷時6個月，勘察、設計、土建和裝修在內(nèi)總費用78萬元，2889元/平米。修繕后，該建筑保持了原有的西式建筑風格，內(nèi)部全框架結構結實耐用。2004年底醫(yī)院小兒眼科、成人眼科進駐后，一樓成為寬敞明亮的視光中心、小兒眼科普通門診、小兒眼科專家門診，二樓是成人眼科門診，三樓是潔凈的手術室。運行1年，平均日門診量在100人次，平均每日手術2臺，年業(yè)務收入達到了220萬元，取得了良好的社會效益和經(jīng)濟效益。對公立醫(yī)院成本控制而言，是一個值得推廣的做法[4]。
2006年7月，因長江大橋武昌匝道 工程需要，在市政府相關部門統(tǒng)一規(guī)劃下，該建筑物連同其它近20幢建筑物被拆除。
4.對其它百年建筑物修繕工作的啟示
江西婺源老民居、安徽徽派建筑、江蘇周莊古建筑等，歷經(jīng)百年風雨，目前多有破損。再過50年、100年，這些古建筑還能否安然存在，是值得堪憂的事。
原汁原味保留外墻，掏空內(nèi)部結構，改用鋼筋混凝框架，不但使原有建筑風格、原有的外墻保留下來，而且使得這些建筑物的使用壽命和嶄新的框架結構房屋一樣，至少可以重新獲得70-100年的使用壽命。該方法不失為一種集保護、使用二合為一，且性價比較高的修繕方式。對不屬于歷史文物范疇的其它百年建筑物的修繕工作，具有借鑒作用。
One method and practice in protecting the old building of hospital
Lu huaxin Lu yang Li hong Huang xianghua
Key words: old building; protecting; practice
參考文獻
[1] 李權時,皮明庥.武漢通覽.武漢:武漢出版社.1988.234-268.
1 材料擺動切割在多線切割機中的應用
多線切割機廣泛應用于 IC（集成電路）、IT（信息技術）、PV（光伏）行業(yè)中，如單晶硅、藍寶石、石英晶體、磁性材料、光學玻璃等硬脆性材料精密切片加工，是光電信息產(chǎn)業(yè)核心器件基片制造流程中的關鍵裝備。多線切割是目前最先進的切片加工技術，其原理是通過金屬線的高速往復運動把磨料帶入待切割材料加工區(qū)域進行研磨，將待切件同時切割為數(shù)百或數(shù)千片薄片的創(chuàng)新性切片工藝。[1]
切割材料擺動型多線切割機以其高效率、高精度、低損耗，所切硅片彎曲度小、翹曲度小、表面質量高等優(yōu)點逐漸取代傳統(tǒng)的多線切割機成為硅片切割加工的主要設備。
由多年的實驗室試驗和產(chǎn)業(yè)化的實踐積累，我們已經(jīng)生產(chǎn)出了更成熟的硬脆材料多線切割機設備。但隨著LED市場的要求越來越高，固有機型的升級改進迫在眉睫，多家企業(yè)已經(jīng)開始進行革新，材料擺動切割正是在這樣的背景下研制成功的。
如圖1所示，料擺結構由工作臺電機帶動擺動電機，由上到下勻速運動，順時針逆時針往復運動，垂直位置作為homing point。
2 電氣硬件結構
如圖2所示，搖擺機構的控制系統(tǒng)由觸摸屏、PLC控制器、伺服驅動器和電機，過擺檢測組成。
HMI與PLC之間使用Ethernet協(xié)議標準，PLC與伺服驅動器之間使用串口協(xié)議標準，PLC中網(wǎng)口串口兼容，使用靈活。
3 PLC簡介
當代FA中，自動控制領域成熟的技術莫過于PLC技術，傳統(tǒng)的繼電器控制系統(tǒng)使用了大量的中間繼電器、時間繼電器，由于觸點接觸不良，容易出現(xiàn)故障。PLC用軟件代替大量的中間繼電器和時間繼電器，僅剩下與輸入和輸出有關的少量硬件元件，接線可減少到繼電器控制系統(tǒng)的1/10-1/100，因觸點接觸不良造成的故障大為減少。PLC控制結構如圖3所示。
CPU是PLC的核心，通常由單片機擔當。它有如下操作：
（1）刷新輸入和輸出。這個功能允許CPU讀取輸入端狀態(tài)和驅動輸出端；（2）執(zhí)行算數(shù)和邏輯運算。CPU能夠處理包括在PLC中的所有算數(shù)和邏輯運算；（3）同存儲器通訊。PLC的程序和數(shù)據(jù)存儲在存儲器中，CPU讀或寫存儲器存儲單元的內(nèi)容；（4）掃描應用程序。應用程序是指梯形圖，是用編程器編寫的指令集，掃描程序允許PLC去執(zhí)行又編程人員編寫的專用應用程序；（5）多樣的脈沖控制?？蓮腃PU單元內(nèi)置輸出點發(fā)出固定占空比脈沖信號，脈沖輸入到伺服電動機驅動器來達到定位/速度控制。
存儲器單元在PLC中是一個存儲信息、數(shù)據(jù)和程序的元件。PLC中帶有只讀存儲器ROM和隨機存儲器RAM。PLC的操作程序存儲在ROM中而梯形邏輯程序存儲在RAM中。根據(jù)控制的復雜程度和型號的不同，PLC的RAM存儲器從1K到16K不等。
PLC的輸入模塊包括開關量、模擬量和特殊用途的模塊。OMRON的開關量輸入模塊是有源輸入模塊，輸入電壓是直流24V，內(nèi)部采用光電隔離，大大提高了抗干擾能力。輸入點數(shù)是24點，中斷脈沖接收輸入最大8點，高速計數(shù)器輸入為4軸，頻率為100kHz（單相）/50kHz（相位差）。
本結構所用的PLC輸出為晶體管漏型輸出，程序最大容量20K步，最大輸入輸出點數(shù)為320點，輸入輸出點數(shù)為40點，輸出點數(shù)16點?？蓴U展兩個串行接口RS-232C端口與HMI進行通訊。
4 PLC編程語言的優(yōu)點
PLC采用簡明的梯形圖、邏輯圖或語句表等編程語言，而無需計算機知識，因此系統(tǒng)開發(fā)周期短，現(xiàn)場調(diào)試容易。另外，可在線修改程序，改變控制方案而不拆動硬件。
PLC的梯形圖程序一般采用順序控制設計法來設計。這種編程方法很有規(guī)律，很容易掌握。對于復雜的控制系統(tǒng)，設計梯形圖的時間比設計相同功能的繼電器系統(tǒng)電路圖的時間要少得多。
PLC的用戶程序可以在實驗室模擬調(diào)試，輸入信號用小開關來模擬，通過PLC上的發(fā)光二極管可觀察輸出信號的狀態(tài)。完成了系統(tǒng)的安裝和接線后，在現(xiàn)場的統(tǒng)調(diào)過程中發(fā)現(xiàn)的問題一般通過修改程序就可以解決，系統(tǒng)的調(diào)試時間比繼電器系統(tǒng)少得多。
5 控制原理
這種擺動結構用到的伺服驅動器可以提供位置、速度、扭矩三種操作模式，經(jīng)分析，此搖擺裝置適于采用位置控制模式。
位置控制模式被應用于精密定位的場合，這種控制方式有兩種命令輸入方式：脈沖及內(nèi)部寄存器輸入，具有方向性的命令脈沖輸入可經(jīng)由外界來的脈沖來操縱電機的轉動角度，最高可接受高達4Mpps的脈沖輸入。為了更方便做位置控制，提供64組位置命令寄存器，利用通訊方式來改變命令寄存器的內(nèi)容值 。
5.1 定位方法
5.2 循環(huán)擺動原理
根據(jù)順序控制的原理，通過PLC指令來變換脈沖數(shù)值的符號位，進而改變電機的轉動方向。當開始信號置1之后，標記標志位，使內(nèi)存地址記住此時的狀態(tài)，脈沖輸出一定的值，通過PLC端子通過內(nèi)部輔助繼電器轉換為電信號，發(fā)給伺服驅動器指令，電機以設定方向開始運動，當脈沖發(fā)出結束，電機運動結束，這時標記標志位取反，正轉指令置0，反轉指令置1，脈沖繼續(xù)發(fā)出，電機此時接收到指令，開始反向運動。
這樣標志位的循環(huán)置位，控制電機的運轉，實現(xiàn)了料臺的往復運動，增加了材料與鋼線的摩擦，提高切割效率。部分程序如圖5所示。
5.3 擺動停止的計算方法
6 結束語
此搖擺結構雖未達到完美，但已經(jīng)應用到了實際機型中，在實踐中再尋找升級方案，客戶的建議是我們的前進動力。這是國內(nèi)半導體行業(yè)大膽自主研發(fā)國外先進技術的新進展，為半導體切割技術提供了新思路。今后還將會不斷地通過研究與實驗完善擺動切割工藝。
大量臨床研究證實早期慢性腎臟病是蛋白尿為主要臨床表現(xiàn)的，而蛋白尿是一個獨立的導致腎臟病變進展的主要因素，減少尿蛋白排泄就能延緩慢性腎臟病進展，因此加強對腎臟病尿蛋白的認識顯的至關重要，為臨床辨證施治提供必要的依據(jù)。
1 中醫(yī)對慢性腎臟病尿蛋白的基本認識 蛋白質是構成人體和維持機體生命活動的基本物質之一，屬中醫(yī)學“精”，“精微”概念。“精”或“精微”既是構成機體的基本物質，又是人體各種功能活動的物質基礎，如氣、血、津液，以及從飲食物中吸收的“水谷精微”等，《素問?金匱真言論》說：“夫精者，身之本也”，《靈樞?經(jīng)脈》說：“人始生，先成精”。因此，尿蛋白是指尿中流失的“精”或“精微”。
1.1 肺虛 肺居胸中，如“華蓋”以覆諸臟，無論吸入之清氣，還是“脾氣散精，上歸于肺”的水谷精微，均以下降為順，“若霧露之溉”，方能布散全身，化生“精氣”，因此，肺有“宣發(fā)、肅降”的功能；肺為“肺為水上之源”，能“通調(diào)水道”，使水津“下注膀胱”，促進和維持水液代謝。肺的宣發(fā)、肅降功能正常，則肺氣通暢，精微四布；水道通調(diào)，水津下達。相反，如慢性腎病患者肺氣失于宣發(fā)、肅降，上歸于肺的水谷精微不能通過肺氣布散全身，化生精氣，致其不歸正道，精微下注，出現(xiàn)尿蛋白。
1.2 脾虛 脾主運化水濕及水谷精微，統(tǒng)攝精、血、津液于一身，與胃共同完成飲食、水谷的消化、吸收、轉輸，所以，脾胃為氣血生化之源、后天之本。慢性腎病患者飲食不節(jié)或勞力太過，均可導致脾失健運，脾氣下陷，統(tǒng)攝失職，精微下注，出現(xiàn)尿蛋白；若脾虛不能運化水濕，濕邪困脾，脾精不散，精微下注，也出現(xiàn)尿蛋白。
1.3 腎虛 “腎者，水臟，主津液”（《素問?逆調(diào)論》），腎是分清泌濁，排出尿液的器官，更是貯藏精氣和約束精氣的臟器?！端貑?六節(jié)臟相論》說：“腎者，主蟄，封藏之本，精之處也”，張景岳也說：“腎者，胃之關也，位居亥子，開竅于二陰，而司約束”（《景岳全書》）。當各種原因導致慢性腎病患者腎之封藏功能失職時，則精氣不藏，精微外泄，出現(xiàn)尿蛋白。
1.4 濕熱 “下焦之病，責之濕熱”（《醫(yī)方考》），《雜病證治準繩》亦云：“濕氣入腎，腎主水，水流濕，從其類也”，濕熱之邪與腎病關系密切，“濕熱無形，入肺乘脾，布散三焦”（《臨證指南醫(yī)案?腫脹門》），濕熱壅滯上焦，上焦不利，肺失宣肅，則肺虛；壅阻中焦，中焦不利，脾失統(tǒng)攝，則脾虛；留滯下焦，下焦不利，腎失封藏，則腎虛。肺、脾、腎皆虛，則精微下注，出現(xiàn)尿蛋白。
1.5 瘀血 “腎藏精，精者，血之所成也”（《諸病源候論》）。慢性腎病患者一般病程都較長，纏綿難愈，腎病日久，腎絡失養(yǎng)，脈絡不利，瘀血內(nèi)生。因此，《素問?痹論》謂：“久病入深，營衛(wèi)之行澀，經(jīng)絡時疏，故不通”，《醫(yī)林改錯》曰：“久病入絡為血瘀”。慢性腎病患者腎絡瘀血，精氣不循常道，壅而外溢，出現(xiàn)尿蛋白。
2 中藥治療慢性腎臟病尿蛋白的基本方法
2.1 滋陰補腎法 適用于慢性腎病患者出現(xiàn)尿蛋白而表現(xiàn)為腎陰虛者。代表方：六味地黃丸、左歸丸。以上兩方相比，左歸丸補腎滋陰之效較六味地黃丸強，適用于陰虛較重者。常用補腎陰藥：干地黃、山萸肉、枸杞子、女貞子、旱蓮草、玄參、龜板、鱉甲、五味子等。
2.2 補氣養(yǎng)陰法 適用于慢性腎病患者出現(xiàn)尿蛋白而表現(xiàn)為氣陰兩虛者。代表方：參芪地黃湯。常用益氣藥：人參、黨參、黃芪；常用養(yǎng)陰藥：沙參、天門冬、麥冬、生地、石斛、玉竹、山萸肉、五味子、花粉等；益氣兼養(yǎng)陰藥：西洋參、太子參、黃精、山藥等。
2.3 滋補肝腎法 適用于慢性腎病患者出現(xiàn)尿蛋白而表現(xiàn)為肝腎陰虛者。代表方：麥味地黃丸。常用滋補肝腎藥：玄參、枸杞子、白芍、麥冬、生地、首烏、女貞子、旱蓮草、龜板、鱉甲、五味子等。
2.4 滋陰降火法 適用于慢性腎病患者出現(xiàn)尿蛋白而表現(xiàn)為陰虛火旺者。代表方：知柏地黃丸、大補陰丸等。常用藥：黃柏、知母、丹皮、生地、玄參等。
2.5 滋陰潛陽法 適用于慢性腎病患者出現(xiàn)尿蛋白而表現(xiàn)為陰虛陽亢者。代表方：天麻鉤藤飲、鎮(zhèn)肝熄風湯等。常用滋陰熄風潛陽藥：鉤藤、白芍、生地、夏枯草、龍骨、生牡蠣、龜板、鱉甲、石決明、珍珠母等。
2.6 補氣溫腎法 適用于慢性腎病患者出現(xiàn)尿蛋白而表現(xiàn)為氣虛者。代表方：金匱腎氣丸加減。常用補腎藥：熟地、山萸肉、枸杞子、菟絲子、首烏、女貞子、肉蓯蓉、補骨脂、沙菀子、杜仲等；常用補氣藥：黃芪、人參、黨參、山藥、白術等。
2.7 溫補腎陽法 適用于慢性腎病患者出現(xiàn)尿蛋白而表現(xiàn)為腎陽不足者。代表方：右歸丸、金匱腎氣丸等。以上兩方相比，右歸丸溫補腎陽之效明顯強于腎氣丸。常用溫補腎陽藥：附子、肉桂、仙茅、仙靈脾、肉蓯蓉、菟絲子、杜仲、川斷等。
2.8 陰陽并補法 適用于慢性腎病患者出現(xiàn)尿蛋白而表現(xiàn)為陰陽兩虛者。代表方：二仙湯。常用平補腎之陰陽藥：熟地、枸杞子、菟絲子、杜仲、山藥、五味子、鹿角膠等。
古代醫(yī)家治療慢性腎病患者尿蛋白大多采用“扶正、祛邪”相結合的基本方法。①補中提升：《靈樞?口問》說：“中氣不足，溲便為之變”，張景岳也強調(diào)“下陷者宜升提”。在用藥上，一是取“健脾益氣”的藥物，如黨參、黃芪、白術、茯苓、山藥、甘草等；二是取“升提清陽”的藥物，如柴胡、升麻、桔梗、荷葉等；三是取“健脾固腎”的藥物，如山藥、薏苡仁、芡實、菟絲子、蓮子肉等；四是取“通補任督”藥物，如龜板、鹿角片、鱉甲等。②補腎固精：藥用龜板、阿膠、金櫻子、菟絲子、山萸肉、枸杞子、沙菀子、蓮子、蓮須、芡實、紫河車等。③清補相兼：清熱化濕藥聯(lián)合健脾補腎藥。如清代王夢英所制定的甘露消毒丹是“疏行氣機，疏利小便，清解邪熱”的方劑。方中連翹、黃芩配合木通、滑石、藿香、蔻仁，能清熱化濕，再配合太子參、白術、薏苡仁、芡實、山茱萸、菟絲子，能斂精固精。④清上固下：就是清解肺熱，健脾補腎。清代醫(yī)家多用荊芥、黃芩、桔梗、地骨皮、葶藶子、白茅根，配合芡實、白蓮須、山茱萸、女貞子、山藥等[1]。
3 當代中醫(yī)學者治療慢性腎臟病尿蛋白的經(jīng)驗 隨著中醫(yī)藥治療慢性腎病患者尿蛋白經(jīng)驗的積累，當代中醫(yī)學者圍繞尿蛋白的治法、治則，提出很多獨到的見解。
王鋼教授治療慢性腎病蛋白尿，提倡重視脾胃。脾、腎在生理上有先、后天的關系。雖然慢性腎病患者病本在腎，但病理上與脾、胃密切相關。先賢謂“中氣不足，溲便為之變”，“諸濕腫滿，皆屬于脾”，“脾虛則土不制水而反克”。由此可見，脾失健運，濕邪留戀是慢性腎病患者出現(xiàn)蛋白尿的主要因素之一。脾胃乃后天之本，中土健旺，后天可資先天。脾胃強弱還決定了慢性腎病患者病情發(fā)展和預后，而且，藥物的作用也依賴于脾胃的敷布與轉輸，若脾胃之氣不旺，則虛不受補，反而徒增其害[2]。
鄭平東教授認為，腎受五臟六腑之精而藏之，腎中精氣有賴于后天水谷精微的培育和補養(yǎng)，才能不斷充盈和成熟。對于慢性腎病患者而言，脾、腎之中一臟傷則兩臟俱傷，一臟損則兩臟俱損。脾不僅為腎輸送水谷精微，加強腎的封藏作用，其本身也有固攝精微和升清降濁的功能。如果脾功能異常，不僅不能助腎，其本身統(tǒng)攝精微和升清降濁的功能也會受到影響，清者不升，濁者不降，致使尿蛋白更加嚴重。因此，在治療慢性腎病尿蛋白時，即使是在邪實的情況下，也不要忽視顧護脾、腎[3]。
邵招弟教授認為，腎為水火之宅，內(nèi)寓元陰、元陽，為人體陰陽之根。腎之陰陽失衡，氣血、陰陽虧虛是慢性腎病患者產(chǎn)生尿蛋白的根本原因。邵氏指出，氣血失調(diào)是尿蛋白產(chǎn)生的最重要病理因素。"腎為氣之根"，脾為氣血生化之源，脾腎虧虛，則氣血不生；腎主藏精，肝主藏血，肝腎虧虛，則精血不能互生。因此，肝、脾、腎虛損常致氣血失調(diào)，從而，導致氣虛不攝，水津不行痰濕內(nèi)生，血行不暢等病理變化。治療慢性腎病患者尿蛋白，首先強調(diào)從病理機制上把握陰陽，消除產(chǎn)生蛋白尿的病理基礎。傷其氣者，增其陽，耗其精者，益其陰，正所謂"益火之源以消陰翳，壯水之主以制陽光"。另外，調(diào)理氣血注重養(yǎng)氣益血、化氣行水、行氣活血，同時，也非常注重健脾補腎、扶正攝精等方法[4]。
葉傳慧教授認為，清利濕熱是治療慢性腎病尿蛋白的關鍵，所謂“濕熱不除，蛋白難消”。濕性粘滯膠結，不易速去的特性也是尿蛋白久治難消的原因。濕邪粘膩而滯，常易化熱，濕熱中阻，脾胃不能升清降濁，使精微物質吸收、輸布異常，出現(xiàn)尿蛋白；濕熱下注，擾動腎精，使其封藏失職，精微下泄，出現(xiàn)尿蛋白；臨床上大量激素、免疫抑制劑、抗生素的應用，必然損傷脾胃，助濕生熱，加重腎絡損傷，影響腎之封藏，出現(xiàn)尿蛋白。因此，必須注重對濕熱的治療，臨證時多用藿香正氣散、龍膽瀉肝丸、菟絲子丸等方藥加減。另外，瘀血是慢性腎病患者臟腑功能失調(diào)的病理產(chǎn)物。腎藏精，精化血，精血互化，故有“腎化血”之說。也就是說，腎與血之生成、輸布密切相關。慢性腎病患者在發(fā)病初期，邪氣侵擾腎絡，腎絡氣血痹阻，即可出現(xiàn)瘀血；慢性腎病多病程悠長，纏綿難愈，久病入絡，痹阻腎絡，可發(fā)瘀血；腎病日久，正氣衰敗，氣虛不攝，血失常道，亦為瘀血。因此，瘀血貫穿著慢性腎病發(fā)病的各個時期。治療慢性腎病患者蛋白尿均強調(diào)活血化瘀法的運用，常用川芎、桃仁、紅花、丹參等藥物[5]。
謝貴權教授認為，慢性腎病患者無論何因導致尿蛋白，其病機關鍵在于腎氣不固，精微失攝。其病位在腎，但與肺、脾、肝相關，其中，與脾腎關系密切。脾腎虧虛是其本，風、熱、濕、毒是標。常用七法辨治：祛風法、清熱解毒法、利水祛濕法、活血化瘀法、平肝熄風法、健脾益氣法、補腎攝精法等。另外，強調(diào)必須正確處理扶正與祛邪，扶正應重視補益脾腎，祛邪應以祛風除濕熱為主[6]。
4 結語 中醫(yī)學認為，慢性腎病患者所出現(xiàn)的尿蛋白是人體“精微下注”、“精(氣)外泄”的病理產(chǎn)物，屬“精”，“精微”范疇。腎主“藏精”，脾主“運化水谷精微”，肺主氣，“氣布精”，腎、脾、肺皆為調(diào)節(jié)機體“精(氣)”代謝的主要器官。腎、脾、肺功能失調(diào)，則內(nèi)生濕熱、瘀血等病理產(chǎn)物，最終，導致精微下注，精氣外泄，形成尿蛋白。因此，國內(nèi)學者多從“腎、脾、肺、濕熱、瘀血”分別論治慢性腎病尿蛋白。
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中圖分類號：G640 文獻標志碼：A 文章編號：1674-9324（2014）51-0211-02
一、植物蛋白產(chǎn)業(yè)概況
植物蛋白是人類的重要營養(yǎng)源，因而是食品工業(yè)一個非常重要的分支。如何有效利用植物蛋白資源、如何得到高品質的植物蛋白產(chǎn)品及如何處理好植物蛋白生產(chǎn)與環(huán)境的關系是當前國內(nèi)外研究及工業(yè)生產(chǎn)的重要課題。我國的植物蛋白工業(yè)起步于20世紀80年代，成長于90年代，擴大于2000年之后。與歐美及日本等發(fā)達國家相比，我國的植物蛋白工業(yè)規(guī)模雖然非常龐大，但是技術落后，植物蛋白產(chǎn)品的經(jīng)濟附加值低，專一性及功能性較差。這與我國植物蛋白工業(yè)起步晚，生產(chǎn)經(jīng)驗不足及從業(yè)人員整體水平不高等客觀原因密切相關。為了使得我國植物蛋白工業(yè)盡快扭轉這個現(xiàn)狀，積極地追趕和超過發(fā)達國家，高校應該為植物蛋白企業(yè)輸送更多更好的專業(yè)技術及創(chuàng)新人才。
二、高校輸送植物蛋白從業(yè)高水平人才的挑戰(zhàn)與機遇
關于高校輸送植物蛋白從業(yè)高水平人才的挑戰(zhàn)，本文將從企業(yè)、大學、教師和學生四方面來分析。
目前我國植物蛋白企業(yè)一般分布在經(jīng)濟不發(fā)達地區(qū)，生產(chǎn)技術水平不高，對于高水平人才不是很渴求。同時，由于這樣的生產(chǎn)狀況，生產(chǎn)產(chǎn)品種類少，功能性差，經(jīng)濟附加值也低，從而導致企業(yè)從業(yè)人員的薪酬較低。這進一步限制了人才的從業(yè)愿望。不過，隨著社會的不斷發(fā)展進步，人們對于飲食的要求越來越高（美味、健康、營養(yǎng)和安全）。這就需要植物蛋白企業(yè)提高自身的生產(chǎn)技術水平，提高植物蛋白產(chǎn)品的品質。在此趨勢下，植物蛋白企業(yè)將需要越來越多植物蛋白方面的人才。
目前大學的教育模式依然是以教師的講授為主，大學生的課程任務較重，學生疲于應付考試，對于所學課程會有一定抵觸心理。這些狀況非常不利于對于學生學習興趣的培養(yǎng)，而且學生對于所學知識不能很好地理解和掌握。因為這種種問題的存在，許多國內(nèi)高校開始積極開展各種方式的教學改革。華中科技大學劉玉教授建立的“點團隊”是“寓教于研”的一個非常成功的例子[1]，她將自己與企業(yè)合作的項目帶進研究室，讓“點團隊”成員組成不同項目小組，由項目負責人帶領小組成員團結協(xié)作，共同解決問題。這種方式極大地調(diào)動了學生的理論聯(lián)系實際、解決實際問題的興趣和積極性，以及小組成員團結合作的精神。同時，團隊成員受到了許多大型企業(yè)的青睞。清華大學為進一步調(diào)動學生課外鉆研的主動性、積極性，充分發(fā)揮學生獨立思考、探索和渴望解決問題的主動性等，基于“寓教于研”的理念，設立了大學生研究訓練計劃，取得了非常喜人的成果[2]。校食品學院在教育改革方面也做出了積極的嘗試，為大學生設立了多個項目。讓學生盡早選定導師，為學生了解專業(yè)現(xiàn)狀提供了基礎；在了解專業(yè)的前提下，學生可以根據(jù)興趣通過“Participation in Research Program”項目進入實驗室[3]，進一步了解實驗技術和科研方法；還有可以選擇導師，通過組隊進行“大創(chuàng)項目”的實踐和研究[4]。
發(fā)達國家的高等教育起步早，非常注重學生的興趣、動手能力、獨立思考能力、創(chuàng)新思維、個性、責任心等培養(yǎng)。日本的國立巖手大學的教師/學生比大，非常注重對于學生的引導及啟發(fā)，注重興趣及責任心培養(yǎng)，尊重學生選擇。大學生的學習主要可以分為兩個階段：大一到大三的各專業(yè)知識學習及大四的所選專業(yè)的進一步學習。在前一階段，食品方向的各專業(yè)教授會根據(jù)專業(yè)的發(fā)展適當?shù)匦薷慕虒W內(nèi)容，并且系統(tǒng)地設計一個本專業(yè)的經(jīng)典實驗，使學生對于各專業(yè)的基礎及前沿知識有個基本了解；在后一階段，學生在了解各專業(yè)的基礎上，根據(jù)自己的興趣，選擇一個實驗室，在導師直接指導下，獨立完成一個比較系統(tǒng)的研究課題。通過這種教育模式，學生動手能力非常強，獨立思考能力也得到了增強。另外，在實驗室期間，指導教師非常注重學生為人處世能力（如守時、團隊精神、做事方式、說話方式等）的培養(yǎng)，這有利于學生很好地融入社會。在美國的北達科他州立大學，該校的教師/學生比大，非常注重小班教學和教師與學生的互動，積極地支持大學生進入實驗室，在指導教師的直接指導下，進行科研訓練及參與企業(yè)的合作項目，并且給予一定的經(jīng)濟報酬。學生在經(jīng)歷一段時間的實驗室生活后，如果發(fā)現(xiàn)對于該專業(yè)不是很感興趣，還可以自由選擇另一個實驗室，甚至是非所學專業(yè)的實驗室。這種教育方式非常有利于調(diào)動學生學習積極性及學生個性的培養(yǎng)，可為社會輸送各種形式的人才。
Abstract：CASP is the assessment activities representative of the world advanced level of protein structure prediction . TBM can analyze the relationship between structure and function of proteins and protein molecular design. This paper reviews target protein collection， prediction model collection ， evaluation measures and the top5 template-based protein structure prediction methods through the analysis and discussion in CASP10. For proteome studying，especially for those who is difficult to determine the protein structure through experiment analysis has theoretical significance and practical value.
Key words：CASP10； Evaluation measures ；Template-based modeling
迄今為止，蛋白質結構預測已經(jīng)有近40年的歷史，期間，人們提出了一系列預測方法，取得了豐碩成果。自1994 年起每兩年在美國加利福尼亞州舉辦一次蛋白質結構預測評比活動-CASP。它代表著蛋白質結構預測領域的世界前沿水平，深入客觀的分析了當前的蛋白質結構預測技術水平， 認識到當前的方法能力與局限以及將來的發(fā)展方向。CASP 主要包括三部分：①靶蛋白質序列的收集；②蛋白質結構預測模型的收集；③蛋白質結構預測模型及預測方法的評估， 組織會議公布和討論結果。
1 CASP10簡介
1.1靶蛋白質序列的收集 在2012年舉辦的CASP10中，來自23個國家的217個預測小組以114個靶蛋白提交了超過66000個預測結果。所選擇的靶蛋白被分為全型靶蛋白和僅服務器靶蛋白。全型靶蛋白是從具有挑戰(zhàn)性的靶蛋白中選出來的典型例子，難度評估指標是基于啟發(fā)式搜索和PSI-BLAST模板搜索得出的[1]。并且，在CASP10中，考慮到模板的共識增加了目標類別定義的特殊性，基于得分和LOMETS線串比對的共同判斷將靶蛋白分為四組：平常組、簡單組、困難組和極其困難組。
1.2蛋白質結構預測模型的收集 靶蛋白預測結果公布的時間內(nèi)，各個靶蛋白通過自動分配系統(tǒng)自動轉發(fā)給參賽服務器，追蹤收集服務器的狀況。經(jīng)過初步評估服務器預測結果之后，預測小組提交較好的模型（GDT_TS[2，3]> 60）。在近三次的CASP比賽中，每次都有超多100個服務器小組參賽，服務器預測組數(shù)量超過了專家預測組，這反映了在結構預測方面自動化程度的提高。為了適應預測結果的龐大數(shù)據(jù)，修改了預測結果處理，存儲，評估和可視化的原則。在CASP10中，接受五種不同格式的預測結果：三級結構TS，殘基-殘基接觸RR，無序區(qū)域DR，模型質量評估QA，結合位點的預測FN。
1.3蛋白質結構預測模型及方法的評估 CASP10最大的變化是質量評估的分類，除了QA之外，稍微改變了RR和DR分類的規(guī)則，對每一個靶蛋白限制預測結果數(shù)目。在DR分類中，也開始要求殘基的預測結果以無序態(tài)。CASP10最明顯的改進是類別的精化。首次出現(xiàn)一個預測小組能成功的提高所有靶蛋白預測的準確度。令人鼓舞的是，這個結果由分子動力學方法得出的，顯示出更多的物理學衍生的方法可為模建做出貢獻。輔助接觸型模建新的分類結果證實這些方法可以與適量的額外信息產(chǎn)生更緊缺型的模型[3]。所有提交的模型以預測中心與獨立評估小組磋商得出的相應實驗參考結構為標準進行評估。為了進行評估，靶蛋白的結構序列，殘基編號，鏈ID需要與公布序列一致[4]。
RMSD[5]是CASP評估中第一個評估標準，并仍然使用。它很適合評估結構非常相似的兩個蛋白之間的差異，但當模建的模型結果非常偏離實驗結果的時候，就不是評估的最佳標準；GDT-TS[5，6]的開發(fā)是為了解決RMSD存在的不足之處，并在CASP中成為一個標準的評價標準。通過擴大閾值后的平均值，更能突出正確結構的得分；GDT-HA[5，6]是GDT-TS改進版，縮小了閾值，更適合高同源性靶蛋白骨架精度評估；GDT-SC[6]用臨近每一條側鏈末端特征原子來比較殘基位置，從而著重在側鏈位置上來突出模型之間差異；GDT-like[5，6]評估模板和模型靶蛋白殘基和相應的靶蛋白預測殘基全局相似性。這些得分，有序列依賴性性質，不能將模型與從與靶蛋白有高結構相似性的不正確構象區(qū)分開來，想要完全得出這些差異，用比對準確度得分AL0（AL4），可以顯示出比對正確對齊殘基所占比例。
CAD[7]是比較基于兩個結構殘基-殘基接觸域不同的一種新的評估標準，得分可幫助找到物理學上更加合理的模型；LDDT[8]是另一種最新推出的無疊合評估標準，是基于模型全原子距離圖譜和靶蛋白結構的比較。相似于CAD得分，非常適合在結構域動態(tài)存在的本地模型質量評估，仍然保留良好的相關性；SG[4]得分反映基于相應子結構局部相似性的模板-靶蛋白相似性，得出的是模型結構與靶蛋白球體一致的百分比；RPF[9]最初開發(fā)是用來評估NMR結構準確度的，類似于IDDT，它是一種基于比較模板和靶蛋白距離矩陣的無疊合標準。已經(jīng)觀察到RPF值和GDT-TS/RMSD值有一個很強的相關性。
Molprobity[10]得分可幫助評估者區(qū)分正確和扭曲立體化學特征的模型。整體得分包括四個部分來評估結構定義的準確性：沖突得分，旋轉異構體異常得分，拉式構像圖偏離得分，拉式構象圖符合得分。
2 CASP10中最佳模板依賴型蛋白質結構預測方法
目前，常用的蛋白結構預測方法分為三類：①針對高相似序列的同源模建；②針對較低序列相似性的折疊識別；③不依賴于模板而利用物理學原理直接進行從頭計算。但實際上由于現(xiàn)在大多數(shù)從頭預測技術依賴結構數(shù)據(jù)庫和統(tǒng)計學原理及其他技術，為了研究需要，自CASP7開始，前兩者合并為模板依賴型蛋白質結構預測方法。CASP10選擇114個蛋白，因為各種原因，最后只包括96個序列，112個評估單元，其中有111個評估單元是基于模板模建的。
2.1自動化的結構評估打分 CASP允許每個提交者提供5個蛋白結構，每一個預測小組，只有命名為“模型1”的模型用于排名。自動化結構評估分為如下四步：①對提交的模型計算GDT-HA，GDC-all，LDDT-15，RPF-9；接著，計算這些打分的平均值和標準偏差，用于計算Z-得分；基于Z-得分，對預測小組進行排名，用來消除差模型造成的罰分。②Z-得分小于-2.0的直接排除；對每一評估單元計算，加入UB即最高得分后，重新計算GDT-HA，GDC-all，LDDT-15，RPF-9的平均值和標準偏差；同時當Z值小于-2時，設置Z值等于-2。③計算每一個度量的Z-得分，并進行求和。④計算了每個AU的得分，通過評估單元的數(shù)目分配綜合得分。而Z-得分只能用于確定前25組，不能用來確定排名，還需配對T檢驗進行重新排名，同時還對模型選擇對結果的影響做了分析。經(jīng)過分析，CASP10評估認證Zhang-Server，QUARK，PMS， LEEcon，Zhang作為基于模板模建最佳預測小組[11]。
2.2最佳模板依賴型蛋白質結構預測方法方法簡介 QUARK[12]最開始是開發(fā)作為無需用到全局模板結構的蛋白質從頭結構預測的，開始于從非冗余PDB結構庫用無縫線串法得到的連續(xù)的分散片段集合。最后，這些片段被運用復制-交換蒙特卡洛模擬由距離輪廓和基于物理學和經(jīng)驗誘發(fā)復合指導下組裝成全長模型。在新的開發(fā)中，從LOMETS線串比對提取的空間限制被用于協(xié)助QUARK結構重組模擬。
Zhang和Zhang-Server[13]方法是由I-TASSER與QUARK結合相互作用開發(fā)的。本質上是相同的，不同的是Zhang是采用的CASP10服務器上的模板，而后者采用的是內(nèi)部線串方法得到的模板。整體結構預測包括以下三個基本步驟：①模型識別， 目標序列來自非冗余PDB結構庫，用LOMETS來確定合適的模板比對；②基于模板和從頭結構組裝；③模型的選擇與改進。運用7-MQAP方案來選擇模型，包括I-TASSER 的C-得分，TM-得分，五個統(tǒng)計指標（RW，RWplus， Dfire，Dope和verify3D）。最后，7個MQAP得分總和作為MQAP一致性得分，低一致性得分的模型最終被選擇出來用于提交。
PMS[14]是基于能量函數(shù)和蛋白質3D模型質量評估的全局優(yōu)化方法，在側鏈原子細節(jié)模建以及主鏈結構模建的準確性來說相當成功。PMS對于蛋白質的3D模型的模建，開發(fā)了一種新的洛倫茲型能量項取代在MODELLER中使用的高斯型或樣條函數(shù)用于結構約束限制。利用構象空間退火來優(yōu)化能量函數(shù)。對于模板選擇和比對，利用隨機森林算法開發(fā)了一種新的質量評估方法。在折疊識別步驟中，質量評估方法被用于重新排序由FOLDFINDER產(chǎn)生的候選模板。
LEEcon[15]相似于PMS，但是考慮到從FOLDFINDER獲得其他模板。Leecon模建是利用SERVER預測方法即從CASP10的所有SERVER模型最大集群中選擇模型的一致性方法。進行SERVER模型的結構集群，并確定出最大的集群。對于序列查詢，F(xiàn)OLDFINDER用域從PDB中識別最佳模板。排除掉與模板有幾乎相同的結構（TM-得分≥0.975）和很不相似的結構（TM-得分
3 總結和展望
掌握蛋白質的結構信息對于研究蛋白質的功能及作用機制具有重要意義。對于蛋白質結構和功能， 雖然可以通過實驗的方法來實現(xiàn)， 但當前的蛋白檢測技術水平還遠遠跟不上由“人類基因組計劃”不斷發(fā)展所產(chǎn)生的海量生物信息，所以利用蛋白質預測技術協(xié)助實驗科學變得尤為重要。CASP作為蛋白質結構預測領域的世界前沿水平代表，可以客觀的反映蛋白質結構預測技術水平。CASP10所得到的最佳5種模板依賴型蛋白質結構預測方法：Zhang-Server，QUARK， PMS，LEEcon，Zhang可對研究蛋白質組尤其是對那些通過實驗難以測定結構的蛋白質分析則具有理論意義與實用價值。并且首次出現(xiàn)一個由分子動力學方法得出的預測小組能成功的提高所有靶蛋白的準確度，顯示出更多的物理學衍生的方法可為模建做出貢獻?？傊?，藥物生物信息學對蛋白結構和功能的預測與實驗科學的發(fā)展結合起來，將給蛋白質設計、藥物設計等生命科學領域提供巨大的幫助。
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Turbidimetric Immunoassay Method and Dry-slide Bromocresol Green Method in(ALB)Serum Albumin Determination:
A Methodological Comparison and Bias Assessment
FENG Pin-ning,GAO Ling,YU Xiong-wen,et al.
Laboratory Medicine Department of the First Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080,China
【Abstract】 Objective The article compares the bias assessments of turbidimetric immunoassay method and dry-slide bromocresol green method in ALB detection, and discusses whether the bias of the two detection results are within the range permitted, so as to ensure the comparability of the results.Method According to NCCLS standardization document EP9-A2 [1], firstly 8 clinical samples are daily taken and tested duplicates under each method, altogether five days. Next the outlier points are excluded and correlation coefficients and expected deviations are calculated. The value is restricted by 1/2 of the error that external quality assessment allows(ALB+10%)by CLIA’88 as the method comparison result system error, and then it is bias assessed.Results The results of comparison between dry-slide bromocresol green method and turbidimetric immunoassay method are as follows: r2=0.934,when medical decisions are 20 g/L,35 g/L and 52 g/L,the expected relative deviations of dry-slide bromocresol green method are 10.4%,6.8%,3.2% respectively. When Xc=20 g/L and Xc=35 g/L, there are significant differences between the results of two methods.Conclusion Turbidimetric immunoassay is regarded as the methodology in comparison. Dry-slide bromocresol green method, however, proves positive deviations in the results of ALB determination. Its value of bias increases with the decline of ALB concentration, and it is more apparent when the concentration turns low. These two methods have poor correlation. Therefore, when different analysis methods are utilized in the detection of the same object, it is suggested different methodological comparisons and bias assessments be used in each method to make clear the disparities among them and then establish each reference range, especially the concentration reference values of different methods in different medical decisions, to insure the comparability of the detection results.
【Key words】 (ALB)serum albumin; Turbidimetric immunoassay method; Dry-slide bromocresol green method;Bias
作者單位:510080中山大學附屬第一醫(yī)院檢驗醫(yī)學部
血清白蛋白測定是醫(yī)院常規(guī)的生化檢驗項目,可作為診斷某些疾病(腎病綜合征,肝硬化等)和評估預后的指標,其值的高低也可作為血液透析,腎移植患者生存期等的預測指標[2]。是一種非特異性的,具有預后價值的標志物。
目前測定白蛋白的方法有電泳法,免疫法和染料結合法。不同的方法測定ALB的結果存在一定的差異,在某些疾病的患者(腎衰竭),不同方法的測定結果可以存在較明顯的偏倚 [2],特別是在低濃度時尤為顯著。其差異將對臨床的診療觀察和療效預后帶來誤導,因此,血清ALB測定的準確性對臨床醫(yī)療的意義十分重大。本文依據(jù)NCCLS標準化文件的EP9-A2,對干化學法及免疫透射比濁法測定ALB的結果進行方法學比較及偏倚評估。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 儀器 由日本Hitachi公司提供的Hitachi7170A全自動生化分析儀,美國強生公司提供的Vitros950生化分析儀。
1.1.2 試劑材料 Hitachi7170A免疫透射比濁法白蛋白試劑,質控品,定標液由基恩科技有限公司提供,批號分別為2364301,2322901,2323101。Vitros950白蛋白試劑,定標液均由美國強生公司提供,批號分別為0935-2097,KiT4 0456;質控品是英國RANDOX公司提供的Assayed human sera level Ⅰ和level Ⅱ質控品,批號分別為482UN,292UE/2。
1.1.3 標本 標本來自中山大學附屬第一醫(yī)院,選取健康人群或患者新鮮血清標本40份,無明顯溶血,黃疸,脂濁,標本的濃度分布范圍為ALB50 g/L(4份)。
1.2 方法
1.2.1 測定方法 免疫透射比濁法在Hitachi7170A上測定;干化學法(BCG法)在Vitros950上測定。
1.2.2 方法對比實驗 依據(jù)EP9-A2文件,每天隨機選取8份標本,先對標本進行隨機排序,按1-8編號,每份標本分別用免疫透射比濁法,干化學法進行雙份測定,先按1-8的順序測定第一次,再按8-1的順序測定第二次,連續(xù)測定5 d,記錄數(shù)據(jù)。測定結果以免疫透射比濁法為比較方法進行比較及偏倚評估。
1.2.3 結果繪圖
實驗數(shù)據(jù)繪制四張圖:①Yi對Xi的散點圖 (圖1)② Yij對Xi的散點圖(圖2)③(Yi-Xi)對(Yi+Xi)/2的偏差圖(圖3)④(Yij+Xi)/2對(Yi+Xi)/2的偏差圖(圖4)。
1.2.4 判斷離群點 40個數(shù)據(jù)中只允許排除一個離群點,若離群點多于一個,則需增加8個實驗數(shù)據(jù)。
1.2.4.1 目測線性及離群點
1.2.4.2 方法內(nèi)離群點的檢查 計算樣本雙份測定的差值絕對值的平均值(DX和DY)及樣本雙份測定的標準化差值絕對值的平均值(DX’和DY’),若Xi1-Xi2,Yi1-Yi2分別超過4DX,4DY界限且DX’,DY’分別超過4DX’, 4DY’則視為離群點。
1.2.4.3 方法間離群點的檢查
計算方法間測定的絕對差值的平均值(E)及方法間標準化絕對差值的平均值(E’),若Eij,E’ij分別超過4 E,4 E’則視為離群點。
1.2.5 線性回歸分析及偏倚評估
計算線性方程及相關系數(shù),根據(jù)線性方程計算給定醫(yī)學決定水平(Xc)的預期偏倚及95%的可信范圍。若r2預期偏差可信區(qū)間的上限(預期偏差可信區(qū)間的上、下限為負值時,取其絕對值進行比較),預期偏差小于可接受偏差的概率很高(>97.5%),試驗方法與對比方法相當,可以接受;②預期偏差的可信區(qū)間的上限>EA>預期偏差的可信區(qū)間的下限,則數(shù)據(jù)未顯示試驗方法的偏差有別于可接受偏差,試驗方法與對比方法相當;③EA97.5%),試驗方法與對比方法不相當,不能被接受。
2 結果
2.1 兩種方法測定結果見表1;繪制散點圖及偏差圖:見圖1～4。
表1
免疫透射比濁法與干化學法測定ALB結果
干化學法(Y)免疫透射比濁學(X)
Y1Y2Y1-Y2Yi X1X2X1-X2Xi
120.420.50.120.4519.619.10.519.35
234.334.3034.331.331.90.631.6
337.838.30.538.0532.733.30.633
436.836.90.136.8531.231.10.131.15
…
1240.841.70.941.2537.537.20.337.35
…
3947.747.20.547.4545.445.4045.4
4050.9510.150.955352.10.952.55
圖1 免疫透射比濁法與干化學法雙份測定均值的散點圖
圖2 免疫透射比濁法雙份測定均值對干化學法所有結果的散點圖
圖3 免疫法與干化學測定均值之差對兩方法重復測定均值的偏差圖
圖4 免疫透射比濁法與干化學法(Yij+Xi)/2 -(Yi+Xi)/2偏差圖
2.2 按照EP9-A2文件進行方法內(nèi)及方法間離群點檢查,40份數(shù)據(jù)未發(fā)現(xiàn)有離群點。計算得到干化學法與免疫透射比濁法的r2=0.934
表2
干化學法在給定醫(yī)學決定水平的預期偏差及可信限
免疫透射比濁法(g/L)1/2 Xc允許誤差(g/L)干化學法(g/L)預期偏倚(g/L)Bc95%可信限
下限上限
相對偏倚(%)
20±122.082.081.302.8710.4
35±1.7537.042.041.852.236.8
52±2.653.641.641.172.113.2
3 討論
目前白蛋白的測定方法,在臨床實驗室應用最廣泛的常規(guī)方法是BCG染料結合法,染料結合法易受反應液pH、ALB與染料結合的密切程度及球蛋白的非特異干擾,導致測定結果偏高。在BCG法基礎上發(fā)展的干片BCG法因其簡便快速,微量敏感,抗干擾能力強,近年逐漸應用于臨床急診分析,但國外文獻有報道,在威爾士室間質評(WEQAS)中,干片BCG法測定值存在負偏差[3]。隨著現(xiàn)代免疫分析技術的發(fā)展,高特異性、高靈敏度的免疫比濁法越來越多的應用于臨床測定血清白蛋白,該方法易受標本本身濁度、抗血清質量的影響。
免疫法測定ALB,是基于抗原抗體的特異性反應進行檢測的,從方法學上來講是具有高度特異性的。因為ALB的測定缺乏可供對照的參考方法,所以本研究以免疫透射比濁法作為比較方法,依據(jù)NCCLS的標準化文件EP9-A2,對免疫透射比濁法及干化學法測定ALB結果的進行比較評價。通過數(shù)據(jù)的分析,表明干化學法測定ALB的結果與免疫透射比濁法相比存在正偏差,相對偏倚隨著ALB濃度的減低而增大,在低濃度時偏差更加顯著。
干化學法測定ALB是在一個完整配套、統(tǒng)一的檢測系統(tǒng)中進行,其所用的儀器、試劑、定標液、方法學、操作程序均是相配套且實行嚴格的標準化程序,方法可溯源至已核準的NIST SRMR927c。但是,干化學法實質是BCG法,BCG法由于與球蛋白存在非特異性反應而使ALB測定結果偏高,雖然通過縮短反應時間可以有效減少干擾。但有研究表明在α2球蛋白含量較高,尤其當A/G
目前國際上還沒有臨床可接受性能的統(tǒng)一判斷標準,CLIA’88室間質量評估允許誤差指標是世界上影響最大的法定允許誤差指標[4],是很多國家臨床檢驗的最低質量指標,該指標可用于檢測系統(tǒng)或檢測方法分析性能的評估,以評價實驗室內(nèi)方法間檢測結果的可接受性。因此,本研究以CLIA’88規(guī)定的室間質評(ALB+10%)允許誤差的1/2作為方法比較結果系統(tǒng)誤差的允許限值,通過方法間預期偏倚的計算,在Xc= 20 g/L及Xc=35 g/L時,干化學法的預期偏差95%可信限的下限大于系統(tǒng)誤差允許限值,表明干化學法對比免疫透射比濁法,預期偏差大于可接受偏差的概率很高(>97.5%),測定結果存在顯著差異。但是,因為免疫透射比濁法不是參考方法,所以并不能判斷ALB在此醫(yī)學決定水平濃度時,干化學法的測定結果是否可以接受,也不能說明兩種方法哪種更準確,只能說明兩者在低濃度水平時測定結果差異較顯著。
方法學比較實驗是實現(xiàn)分析方法準確度溯源及檢驗結果可比性的一個重要途徑。由于方法間的差異,實驗室應該對不同檢測方法建立相應的參考范圍,特別是建立不同方法在不同醫(yī)學決定水平濃度的參考值。當實驗室內(nèi)使用不同分析方法對同一分析物進行分析時,應該進行方法學比較及偏倚評估,明確各種方法存在的差異,以保證測定結果的可比性。
參 考 文 獻
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[4]叢玉隆,馮仁豐,陳曉東.臨床實驗室管理學.中國醫(yī)藥科技出版社,2004:111-118.
卡西歐FX一4500計算器是一款可以進行編程的計算器，存儲器雖然只有1100字節(jié)，編程語言簡單，也沒有復雜的邏輯判斷語句，但在施工測量時若能巧妙編輯一些實用小程序，可以達到事半功倍的效果。下面介紹“全站儀隨意擺”放樣法與卡西歐FX一4500計算器相結合應用程序，期待同行提出寶貴意見，以便更好改進。
這里的“任意擺”指的是：不一定將全站儀擺放在坐標點上，而是在與兩個已知點通視(兩已知點不一定通視)的條件下，擺放在任意一個平整、干凈、開闊的地方。這樣可以解決傳統(tǒng)測量放樣時，全站儀一定要擺放在一個已知坐標點上，然后后視另一個已知坐標點而帶來的諸多不便：
坐標點不可能在施工的路基或橋梁上：
后視點被毀，與其它坐標點又不通視，只能放棄。要么從其它兩個點打轉點，對點、整平、重新對后視，測量精度將會降低。
坐標點即使在便道旁邊，與放樣點不通視，仍然要打轉點，即使與放樣點通視，由于施工車輛等外界干擾，仍不能夠滿足施工放樣需要。
而采用全站儀隨意擺可以解除以上煩惱，只要與兩個已知坐標點通視就行，而兩個已知點也不要求通視，下圖為“全站儀隨意擺”放樣法示意圖：
由上圖情況，用傳統(tǒng)方法根本無法放樣，轉點也打不成，但是如上圖全站儀的擺放，則能輕松完成放樣任務，問題是如何求出測站點的坐標。
全站儀擺放點的坐標可以通過卡西歐FX一4500計算器的程序計算出來，所需條件是兩個已知點坐標A(0，P)，B(U，K)和全站儀到兩個已知點的距離A、B，原理如下圖：
A(0，P)，B(U，K)是已知點，其方位角W及間距D可以計算出來。
全站儀測出到A點、B點的距離分別為A、B，則D、A、B三條邊可以構成一個三角形，運用余弦定理求出交會角：
α=arcCos((A2+D2-B2)／(2*A*D))
β=arcCos((B2+D2-A2)／(2*B*D))
則測站點坐標：
X=0+A*COS(W+α)
Y=P+A*Sin(W+α)
或：
X=U+B*Cos(W+180-β)
Y=K+B*Sin(W+180-β)
以上可以用卡西歐FX一4500計算器編制一個程序進行計算．
以測站點起手，按順時針方向的兩個已知點坐標分別為A(0，P)、B(U，K)，與其間距依次為A、B。
程序清單如下：
NEWPOINT
Lb1 0
O=O+OPUKAB
Pol((U-O),(K-P)，
W>0=>(W)：≠>W=(360+W)
D=√((P K)2+(O U)2)
G=Cos-1((A2+D2-B2)＼(2*A*D))
X“X”=O+A*COS(W+G)
Y“Y”=P+A*Sin(W+G)
【關鍵詞】 正交實驗設計; 鈍頂螺旋藻片; 多糖; 脫色; 脫蛋白
鈍頂螺旋藻Spirulina platensisl， 簡稱SP， 是藍藻門、藍藻綱、斷增藻目、顫藻科中的螺旋藻屬低等水生植物。SP是種微藻， 體長約200～ 500 μm，寬僅為5～ 10 μm，因藻體呈螺旋狀而得名。在SP的各種生物活性物質中，螺旋藻多糖(簡稱PSP) 由于具有廣泛而復雜的生物學活性而成為目前SP研究的熱點之一[1]。
“復方螺旋藻片(原名“云南天然鈍頂螺旋藻片”)”是云南大理學院研制的新型功能性保健食品[2]，已獲國家發(fā)明專利(專利號：ZL96107910.X)。研究表明，該保健品具有降低血糖[3]、調(diào)節(jié)血脂[4]、增強機體免疫力[5]等多種作用。多糖是該制劑的主要活性成分之一。為進一步探討“復方螺旋藻片”的作用機制，本實驗以該保健品為原料，采用正交實驗設計對其多糖進行了初步分離純化并進行含量測定。目前，植物多糖的提取通常采取水提醇沉[6]的方法，得到的多糖產(chǎn)品純度較低，主要雜質有色素、蛋白質和一些小分子的物質。色素的存在不僅影響多糖的色澤，同時也影響“復方螺旋藻片”多糖的純度，從而影響其生物活性，阻礙了對多糖的組成及結構與其生物活性關系的理論研究。為此本實驗對該制劑中多糖的提取、除雜、脫色等工藝進行研究，并且對不同脫色和脫蛋白方法的效果進行比較和篩選，使粗多糖得到精制，為進一步研究該保健食品的作用機制提供實驗研究基礎。
1 材料與儀器
1.1 藥品與試劑復方螺旋藻片(原名云南天然鈍頂螺旋藻片)產(chǎn)品，片劑，瓶裝(0.4 g/片×50片/瓶)，云南白藥集團大理制藥廠生產(chǎn)，批號：20081025。由大理學院左紹遠教授提供。SephadexG-100凝膠，北京慧易得科技有限公司生產(chǎn);葡萄糖對照品、牛血清白蛋白為國藥集團化學試劑有限公司進口分裝;考馬斯亮藍G-250為北京鼎國生物技術有限公司進口分裝;其他化學試劑均為國產(chǎn)分析純。
1.2 儀器 B600型低速自動平衡離心機(上海醫(yī)用分析儀器廠);SH-2型磁力攪拌器(北京洪博達科技有限公司);BT-224S型電子分析天平(德國賽多利斯儀器公司);SHZ-3循環(huán)水多用真空泵(上海青浦滬西儀器廠);RE-52A型旋轉蒸發(fā)儀(上海亞東生化儀器廠);FD-1型冷凍干燥機(北京博醫(yī)康技術有限公司);UV 2550型紫外分光光度計(日本島津蘇州儀器有限公司)。
2 方法
2.1 云南鈍頂螺旋藻粗多糖的提取用電子分析天平稱取50g云南鈍頂螺旋藻片劑，經(jīng)研缽充分研磨成細小顆粒狀，加入5倍體積的95%乙醇加熱(70℃)回流3次，2 h/次，去除脂類和其它醇溶性物質，傾出上層液。藥渣于50℃烘箱烘干，15倍水量70℃回流提取2次，每次1 h，過濾，濾液離心(2 000 r/min， 10 min)，上清液濃縮，無水乙醇調(diào)含醇量終濃度為80%，4℃靜置過夜，離心(3 000 r/min， 20 min)后沉淀依次用無水乙醇、丙酮、乙醚反復清洗數(shù)次，抽濾后冷凍干燥，得云南鈍頂螺旋藻粗多糖。
2.2 云南鈍頂螺旋藻多糖的純化云南鈍頂螺旋藻粗多糖加水溶解至100 ml，加入活性炭，40℃下脫色15 min，濾除活性炭，室溫下加入1倍量體積的三氯乙酸，強烈振蕩30 min，靜置過夜，2 000 r/min離心10 min，取上層水相，上清液用NaOH調(diào)pH=7.0，對水透析后減壓濃縮至100 ml，重復上述過程3次得濃縮液，無水乙醇調(diào)含醇量為80%，4℃靜置過夜，離心后沉淀依次用無水乙醇、丙酮、乙醚反復清洗數(shù)次，抽濾后冷凍干燥，得除蛋白精制多糖。低溫烘干得多糖粉末，加水溶解至10 ml，經(jīng)SephadexG-100凝膠柱分離，蒸餾水洗脫，采用蒽酮-濃硫酸法定性，分段收集洗脫液，乙醇沉淀，干燥后得純化后的云南鈍頂螺旋藻多糖。
2.3 云南鈍頂螺旋藻粗多糖的脫色方法
2.3.1 過氧化氫脫色取經(jīng)脫蛋白多糖溶液(0.5 mg/ml)，以氨水調(diào)至pH=9.0，分別加入30%過氧化氫適量，使其溶液中的終濃度分別為0.5%，1%，1.5%，40℃保溫15 min。
2.3.2 活性炭脫色活性炭經(jīng)重蒸水清洗過濾，干燥(120℃，8h)冷凍備用。取經(jīng)脫蛋白多糖溶液(0.5 mg/ml)，分別加入0.5%、1%、1.5%的活性炭，40℃保溫15min。
2.4 云南鈍頂螺旋藻粗多糖脫蛋白的方法水提醇沉法得到的粗多糖含有一定量的蛋白質，本實驗以蛋白質去除率及多糖損失率為指標比較三氯乙酸-正丁醇法、三氯乙酸法和Sveage法3種脫蛋白方法。蛋白脫除率(%)=[(脫蛋白前蛋白質量 -脫蛋白后蛋白質量)/脫蛋白前蛋白質量]×100%多糖損失率(%)=[(脫蛋白前多糖質量-脫蛋白后多糖質量)/脫蛋白前多糖質量]×100%
2.4.1 三氯乙酸-Sevage 法取粗多糖溶液( 015 mg/ml) 50 ml，加入多糖溶液體積1倍量10%三氯乙酸和1 /5體積的Sevage試劑(氯仿∶正丁醇= 4∶1) ，攪拌1 h， 4 000 r/min離心10 min，分出上清液，測定蛋白質和多糖含量。
2.4.2 三氯乙酸法取粗多糖溶液(0.5 mg/ml)50 ml，加入1倍量的20%三氯乙酸，攪拌30 min，靜置過夜，4 000r/min離心10 min，分出上清液，加1 mol/L NaOH調(diào)pH至7.0，乙醇沉淀后測定其蛋白質和多糖含量。
2.4.3 Sevage法取粗多糖溶液(0.5 mg/ml)50 ml，加入1/4體積的Sevage試劑(氯仿：正丁醇= 4∶1)，攪拌1.5 h，倒入分液漏斗中靜置1.5 h，分出水層，測定蛋白質和多糖含量。
2.5 多糖及蛋白質含量測定方法 多糖含量采用蒽酮-濃硫酸法[7]，以葡萄糖為標準品繪制標準曲線。蛋白質含量采用考馬斯亮藍法[8]，以牛血清白蛋白為標準品繪制標準曲線。鈍頂螺旋藻粗多糖提取率(%)=[粗多糖質量(g)/原料質量(g)] ×100%
3 結果
3.1 云南鈍頂螺旋藻多糖提取的工藝根據(jù)單因素初步實驗，影響云南鈍頂螺旋藻多糖提取率的主要因素有水提溫度、水提時間、固液比，為綜合分析各因素的影響，按3因素3水平表采用L9(34)正交實驗設計，各因素水平(見表1)每個實驗重復3次，確定最佳提取工藝，對正交實驗所得的最佳提取工藝進行驗證性實驗。表1 因素水平表由表2可知，影響云南鈍頂螺旋藻多糖提取率的各因素排列為水提溫度(A)>水提時間(B)>固液比(C)，水提溫度對云南鈍頂螺旋藻多糖提取率的影響達到顯著水平。根據(jù)正交實驗的觀點，只選取有顯著性意義因素的最好水平搭配，確定出最佳方案。而對于不顯著性的因素，原則上可以由實際條件酌情處理。綜合各因素K值和極差方差分析比較，得出云南鈍頂螺旋藻多糖的最佳工藝為：水提溫度80℃，水提時間2 h，固液比1∶15，此工藝條件下云南鈍頂螺旋藻多糖的提取率為2.18%，多糖含量為13.65%。表2 正交實驗設計結果
3.2 云南鈍頂螺旋藻多糖脫色方法的比較脫色后的溶液于200～700 nm下進行紫外分光光度法掃描，檢測脫色效果，葡萄糖溶液為對照品進行比較，以多糖損失率為指標考察不同濃度過氧化氫和活性炭脫色的效果[9]。比較不同濃度活性炭脫色和過氧化氫脫色效果及多糖損失率。結果見表3。表3 不同脫色方法對云南鈍頂螺旋藻多糖含量的影響從表3可知，活性炭對云南鈍頂螺旋藻多糖的吸附能力較強，其脫色效果比過氧化氫好，多糖損失率較低。脫色劑種類以及濃度對多糖脫色效果顯示出差異，而用量升高時候多糖損失率明顯增加，通常取0.5%～1%的活性炭能取得滿意的效果。
3.3 云南鈍頂螺旋藻多糖脫蛋白方法的比較多糖中的游離蛋白質可用蛋白質沉淀劑如三氯乙酸、鞣酸等除去，少量蛋白質可選用Sevage法除去[9]。以蛋白質去除率、多糖損失率為指標比較三氯乙酸-正丁醇法、三氯乙酸法和Sevage法脫蛋白的效果，優(yōu)化篩選出適合工業(yè)生產(chǎn)的簡單、高效的云南鈍頂螺旋藻多糖脫蛋白方法。比較上述3種方法脫蛋白的效果。結果見表4。表4 不同方法對云南鈍頂螺旋藻多糖脫蛋白效果比較從表4可知，3種脫蛋白質方法中，蛋白質去除率最高，效果最好的為三氯乙酸-Sevage法，蛋白質去除率達60.26%，但該方法處理后的多糖損失率也較高，達到11.21%;采用Sevage法脫除蛋白質的效果較差，蛋白質去除率僅為17.85%，需要多次使用，而每次使用Sevage試劑除去蛋白質的變性膠狀物時，不可避免溶有多糖，造成多糖損失率達63.51%。三氯乙酸作為一種有機酸，可以使得樣品中的蛋白質因為有機酸而變性沉淀，采用三氯乙酸法去除蛋白質(52.03%)的同時多糖損失率(2.85%)較低，綜合考慮蛋白質去除率和多糖損失率兩個指標，三氯乙酸法是較理想的脫蛋白方法。
4 討論
實驗中通過正交實驗設計水提醇沉法提取云南鈍頂螺旋藻多糖，提取過程中考察了不同的水提溫度(A)、水提時間(B)和固液比(C)對多糖提取量的影響，以最小的RB做誤差估計，RA、RC分別是RB的3.9 倍和3.3 倍。因此，A、C 是影響多糖得率的主要因素，B 則是次要因素， 結合各因素的K值(越大越好)可得優(yōu)選水提溫度80℃，水提時間2 h，固液比1∶15進行提取，多糖產(chǎn)率較高。此外，在多糖的提取過程中還發(fā)現(xiàn)，冰乙醇用量越大，沉降時間越長，多糖沉淀越徹底，得率越高。實驗中控制溶液的醇濃度約80%，過夜沉降。溫度升高，不利于多糖的沉降，故選擇4℃冰箱中冷藏靜置。
提取出來的云南鈍頂螺旋藻粗多糖呈綠色，色素的存在影響色澤和純度，而多糖進一步分離純化往往選用離子交換色譜法，殘留的色素會降低離子交換樹脂的交換能力，因此脫色在多糖純化過程中有著非常重要的作用。此外，云南鈍頂螺旋藻粗多糖中蛋白質的存在會影響對多糖生物活性的進一步研究，因此有必要進行脫色和脫蛋白方法的研究。
過氧化氫脫色的原理是其在受熱過程迅速分解，產(chǎn)生初生態(tài)氧而破壞有色物質，對多糖的脫色效果較活性炭差且多糖損失率較高。活性炭為黑色細微粉末，無毒、無臭、無味，具有多孔結構，能吸附糖液中的色素物質，但同時也會吸附掉部分多糖，造成多糖的組分損失，所以在選擇脫色劑用量上，并不是用量越高越好，而應同時考慮脫色效果與多糖損失兩者的綜合效應。此外，實驗還比較了同種方法對云南鈍頂螺旋藻多糖脫蛋白前后脫色效果。脫蛋白后進行脫色，溶液透光率明顯提高，用1.5%活性炭40℃保溫15 min，糖溶液呈透明狀。蛋白質的存在影響了色素的去除，這可能與色素的性質有關，推測其大多為結合色素。
多糖主要以兩種形式存在，一是以純糖鏈，另一種是糖鏈與肽鏈結合，形成糖肽或糖蛋白，多糖脫蛋白并不是徹底去除蛋白質，主要是去除游離蛋白質，因此在選擇脫蛋白方法時應該注意避免多糖-蛋白質復合物的降解，從而造成多糖-蛋白質特有的生理活性下降。粗多糖中蛋白質的去除通常采用4種方法即酶法、Sevage法、三氟三氯乙烷法和三氯乙酸法[10] 。本文對三氯乙酸-Sevage法、三氯乙酸法和Sevage法3種脫蛋白方法進行了比較，結果表明三氯乙酸法對云南鈍頂螺旋藻多糖的脫蛋白效果較好，而且多糖損失率較小。因此，選用三氯乙酸法進行3次脫蛋白能夠較好的去除蛋白質，但在一定程度上也有可能造成一部分多糖-蛋白質復合物的損失，是否影響到多糖的活性，有待于進一步研究。
參考文獻
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答：關于炒米煮粥的問題，曾經(jīng)有人做過這樣的實驗：將干燥狀態(tài)的粳米放入炒鍋中，用小火翻炒至米呈微黃色。加8倍水按正常煮粥方法烹調(diào)。用未炒過的精制粳米為對照。模擬小腸消化的條件，加入胰酶，測定各樣品的淀粉消化速率。
結果發(fā)現(xiàn)，炒米煮成的粥和生大米煮的粥相比，總淀粉水解指數(shù)有明顯上升。這個指數(shù)越高，意味著消化起來越容易、越徹底。炒米粥的總水解指數(shù)比生米煮成的大米粥高出13%，淀粉消化指數(shù)高出23.7%。測定淀粉組分也發(fā)現(xiàn)，和生米煮成的粥相比，炒米粥的抗性淀粉（2小時之后還不能消化的淀粉）降低了30%。同時，炒米粥的快速消化淀粉（20分鐘內(nèi)就完全消化的淀粉）比例上升了30%。這個實驗結果意味著，炒過的米再煮粥消化起來會更容易、更徹底。
身體虛弱的產(chǎn)婦，或者生病引起消化能力下降的人，或有胃腸疾病的人，都適合喝炒米粥。它們不但可提供營養(yǎng)，所形成的淀粉膠漿還具有良好的消化道黏膜保護作用，有很好的養(yǎng)胃功效。需要提醒的是，對于那些消化能力很強的人來說，特別是糖尿病人和減肥者喝這些快速消化的炒米粥是不利的。因為它們會快速升高血糖，而且會令人很到饑餓。如果一定要吃用炒米做成的粥，那么建議加上一些豆子，可以有效降低血糖上升的速度。
新型驅蚊方法有效嗎？
問：夏天到了，蚊蟲又多起來了?，F(xiàn)在有很多的新型驅蚊方法，如驅蚊手環(huán)、聲光驅蚊器等，這些方法真的安全有效嗎？
答：人類和蚊蟲“斗爭”了成百上千年，想出了無數(shù)驅蚊方法?？偟膩碚f，安全的方法效果比較一般，而有效的方法安全性就要降低，新型驅蚊法也是如此。
驅蚊手環(huán)：專家認為，驅蚊手環(huán)多是“商家玩噱頭”，并不成熟。手環(huán)聲稱所含的香茅、薰衣草等都屬于芳香型草，通過氣味來達到防蚊的效果，有一定的效果但作用不大。而且這些氣味能在手環(huán)上停留多久，有效性保持多久，都很難說。
化學蚊香：盤香片類產(chǎn)品以殺蚊驅蚊為主，廣泛使用的是菊脂類的殺蟲藥劑，以香料為載體，在加熱時，藥物會隨著香料擴散，驅蚊花露水也是靠避蚊胺等化學成分起作用。這些化學產(chǎn)品都有一定的毒性，例如在六神驅蚊水上就可以看到“微毒”的說明字樣，孕婦嬰幼兒也還是要避免使用。其他人使用時，也要注意房間通風。
空調(diào)降溫：把溫度降低到一定范圍內(nèi)能減少蚊蟲的活動。因為昆蟲有一個生存適宜溫度，氣溫在26℃到30℃時蚊子比較活躍，在13℃左右時蚊子會喪失飛行能力?？墒?，一般家用空調(diào)開到13℃是不可能的，而開到18℃的時候蚊子還有一定的活性，仍會咬人，且耗電量大。
聲光驅蚊：市場上有很多以超聲波或者燈光誘捕為原理的驅蚊器。且不論其原理是否靠譜，據(jù)使用者描述： “我曾試用過，一個晚上只捕捉到兩三只蚊子，自己依舊被蚊子咬到?！笨梢婋m然聲光產(chǎn)品雖然沒有化學刺激，但效果差強人意。
鯽魚湯為什么會發(fā)苦？
問：我煮的鯽魚湯為什么是苦的？
答：鯽魚湯發(fā)苦，第一，可能是把鯽魚的膽弄破了，第二可能是洗魚的時候沒有把魚腹腔內(nèi)的黑薄膜搓洗掉，黑膜如不清洗干凈，也是會帶苦味的。所以處理鯽魚的時候一定要把魚鰓、魚肚子里面的東西都去掉洗凈，尤其是肚皮里面不能有黑膜，否則很腥。如果是魚膽破了，可以用米酒、米醋或小蘇打水涂抹魚身，然后用自來水沖洗干凈即可。如果沒有酒、醋、小蘇打等，用雪碧、七喜等檸檬味的汽水處理，效果也很好。
收拾好的鯽魚要放置一會兒再烹飪，這樣做出的魚才鮮。起油鍋，放一點點油，油熱時把鯽魚放入鍋中，換中火。待魚身兩面變黃時，放入料酒，馬上蓋上鍋蓋燜半分鐘，這樣可以讓酒香味進入魚中并去除魚腥味。然后加入清水，放入姜塊和蔥段，大火燒開后改用小火慢慢熬半小時左右，關火前5分鐘放入一點鹽即可食用。魚湯做好之后，最好趁熱喝，其中魚肉也可以吃，而且肉質很嫩，還有淡淡的清香和甜甜的味道。
怎樣挑選百香果？
問：怎樣才能挑選到又香又甜的百香果？
答：百香果首先要選擇果形端正、沒有明顯外形缺陷或突起的果實，如果奇形怪狀，很有可能是用激素催熟的。成熟的百香果存放一段時間后，果皮會出現(xiàn)凹陷現(xiàn)象，此時的果瓤會更加香甜。百香果分山上種植和平地種植，山上成熟的百香果味道更甜且香氣更濃，平地種的果略酸，香氣略遜山地果。
從外觀上看，種在山上的百香果一般比種在平地的果顏色要深，因為山上的果受日照時間長，呈紫色，個頭均勻。平地的果多呈深紅色，個頭稍大。從果肉上分辨，山上種植的百香果果肉為深黃色，平地種植的果為淺黃色。
什么人不宜服用蜂王漿？
問：什么人不宜服用蜂王漿？服用蜂王漿時應該注意些什么？
答：蜂王漿的禁忌人群：
1.過敏體質者。因為蜂王漿中含有激素、酶、異性蛋白，易引起過敏反應。
2.長期患低血壓與低血糖者。蜂王漿中含有類似乙酰膽堿的物質，而乙酰膽堿有降壓、降血糖的作用。
3.腸道功能紊亂及腹瀉者。因蜂王漿可引起腸管強烈收縮，誘發(fā)腸功能紊亂，導致腹瀉、便秘等癥。
4.手術初期及婦女懷孕時。術后病人失血過多，身體嚴重虛弱，此時服用蜂王漿，易致出血。蜂王漿還能刺激子宮收縮，影響胎兒的正常發(fā)育。
5.凡肝陽亢盛及濕熱阻滯者，或是發(fā)高熱、大吐血、黃疽性肝病者，均不宜服用蜂王漿。
6.兒童。兒童處于發(fā)育高峰周期，體內(nèi)的激素分泌處于復雜的相對平衡狀態(tài)，而且供應較為充足，蜂王漿內(nèi)含有極少量的激素，如果飲用，有可能導致兒童微妙平衡的激素分泌失衡，進而影響到兒童的正常發(fā)育。
服用蜂王漿時應該注意些什么？
